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- 萌新求问,Rt-PCR,qPCR,PCR的区别与不同是什么? - 知乎
qPCR就是quantity PCR,定量PCR,也是荧光定量PCR,检测基因转录水平的表达量。 PCR就是一种技术,通过高温变性、低温复性,适温延伸的循环来扩增基因片段。 PCR根据不同的实验目的可以分为许多种,例如上面说的RT-PCR、qPCR,还有反向PCR、梯度PCR、普通PCR等等。
- 荧光定量PCR是用来干什么的? - 知乎
1 qPCR试剂盒 按照MIQE要求,我们必须在文章中清楚的描述完整的反应条件,包括PCR的反应体系配置,用的什么试剂盒,制造商是谁,多大的反应体系,用的是染料法还是探针法。 事情并非仅仅描述那么简单,这就牵涉到大家要如何选择荧光定量试剂盒。
- qpcr 的原理是什么? - 知乎
qPCR在哪里使用? 由于其强大的优势,qPCR的应用范围非常广泛。 该方法已经存在了很长时间,研究界已经证明了它的可靠性和稳健性。 最明显的是qPCR在分子诊断中的应用,它正在慢慢取代传统方法(图3)。
- 师兄您好!请问怎么做绝对定量qpcr? - 知乎
在RT-qPCR实验中,内参基因可以用于校正上样量、上样过程中存在的实验误差,保证实验结果的准确性。 一个好的内参基因应在不同时空样本或不同处理样本中具有相对稳定的表达水平,常见的有ATCB、GAPDH、β-actin、18S rRNA等。
- qPCR曲线异常什么原因?扩增曲线平台期下降? - 知乎
在RT-qPCR的实验过程中,大家或多或少都会遇到扩增曲线异常、熔解曲线异常、重复性差等问题。 给大家整理了SYBR Green染料法的常见问题及解决方案,以供大家参考。 Part 1 扩增曲线异常 正常的扩增曲线一般呈S型,Ct值最好在20-30之间。
- 如何设计好荧光定量pcr的引物? - 知乎
qPCR除了上述的设计原则之外,还需要多考虑一两个方面, 一个就是引物能扩增的目的条带bp数,尽量在200bp以下,当然你选500bp也行,但是效果可能没有那么好。 因为qPCR不需要扩增一个基因的全长,只要证明能扩增出与目的基因特异的片段就可以了。
- qPCR绝对定量如何构建标准曲线? - 知乎
图1 qPCR绝对定量技术实验流程图 二、qPCR绝对定量标准曲线构建 在上一部分我们介绍了qPCR绝对定量的核心原理是通过构建已知浓度的标准曲线来确定未知样品中靶基因的确切拷贝数。
- qRT-PCR 与WB是可以互换的实验吗? - 知乎
另外,WB有些时候不灵,这实验本身就是半定量的,而且步骤繁多很容易出错,相比之下qPCR要好做一些。 有些 分泌蛋白,跑WB异常的费劲,我以前就做过一个分泌蛋白的课题,在换了好几批抗体和样品依然无果后,还是选择用qPCR来解决问题。
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